文章目录

1 材料与方法

1.1 材 料

1.2 朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA5s基因的克隆

1.3 朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA5a、TecCDA5b、TecCDA5c基因特征分析

1.4 朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA5s在不同发育时期的表达

    1.4.1 提取朱砂叶螨不同发育时期的RNA及第一链cDNA合成

    1.4.2 实时荧光定量PCR

2 结果与分析

2.1 朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA5基因的克隆

2.2 朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA5s氨基酸序列同源比对分析

2.3 朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶蛋白结构域分析预测

2.4 分子进化树构建

2.5 TecCDA5基因在朱砂叶螨不同发育时期的表达规律

3 讨 论

文章摘要:【目的】探明朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶家族的功能。【方法】克隆基因TecCDA5a、TecCDA5b、TecCDA5c,并运用实时荧光定量PCR技术进行表达特征的分析。【结果】克隆几丁质脱乙酰基酶基因TecCDA5a、TecCDA5b、TecCDA5c（GenBank:MK813905、MN852245.1、MK813906）;TecCDA5的最高表达水平是在成螨期,而最低的表达水平是在幼螨期,呈现先跌后升的趋势;同源性比较和发育树分析证实,TecCDA5属于几丁质脱乙酰基酶GroupⅣ。【结论】获得朱砂叶螨TecCDA5s,明确了其在螨不同发育时期差异性表达特征,为以CDA为靶标设计新型dsRNA杀螨剂提供依据。

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