《昆虫学报》
文章摘要:经历了长光照和短光照条件,桃小食心虫Carposinasa sakii Matsumura脱果老熟幼虫分别进行非滞育和滞育发育,为了探究在两种发育调控过程中保幼激素(JH)滴度的变化差异,并筛选老熟幼虫JH合成代谢差异表达的基因。试验首先测定分析了两种发育过程虫体JH滴度变化动态,采用Illumina HiSeqTM4000测序平台测定了两种光照条件下老熟脱果幼虫转录组,qPCR验证转录组数据的准确性,筛选差异表达的JH合成代谢基因;结合两种发育方向JH丰度变化差异,探讨这些JH合成代谢差异表达基因的作用。两种光照下幼虫生长过程JH滴度没有差异,均是从幼龄到5龄脱果每龄逐渐降低,脱果时达到最低。随着进入长茧和圆茧,JH滴度发生了明显差异;非滞育发育幼虫进入长茧,JH含量比1d前初脱果增加了3倍;而短光照老熟幼虫滞育发育进入圆茧,1d后结成圆茧,虫体JH丰度比初脱果少量增加,JH滴度显著低于非滞育发育脱果幼虫;并且在后续多个相同的时间点非滞育发育的幼虫JH滴度都显著高于滞育发育幼虫。共获得两种光照下脱果老熟幼虫39330876条序列读取片段,有效转录组数据44.35Gb(SRA登录号:PRJNA495711),组装拼接获得56723个单基因簇(unigene),平均长度963bp,其中1kb以上的unigene有16343条,经过BLASTX比对成功注释27180个unigene。两种脱果老熟幼虫存在993个差异表达基因,包括7个JH合成代谢相关基因;其中jhamt在长光照老熟幼虫表达量是短光照的3.4倍,jheh1、jheh2、jheh3和jheh4在长光照老熟幼虫头部表达量分别是短光照的19.6、1.9、4.3和0.4倍,jhbp1和jhbp2在长光照老熟幼虫头部表达量分别是短光照的2.7和20.5倍。研究明确了桃小进入长茧需要JH滴度快速升高的过程,获得了两种光周期下老熟脱果幼虫高质量的转录组数据,筛选并分析了JH合成代谢相关的7个差异表达基因,为进一步研究桃小不同发育调控过程中JH 的作用机制奠定了基础。
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