文章摘要:【目的】探究在柑橘大实蝇成虫触角高表达的化学感受蛋白BminCSP3与气味配体的结合特性，以期为揭示柑橘大实蝇嗅觉识别的分子机制提供一定理论依据。【方法】通过RT-PCR克隆BminCSP3基因，并对其进行生物信息学分析；以原核表达系统和镍柱体外表达纯化得到BminCSP3蛋白；利用荧光竞争结合实验检测BminCSP3与14种气味配体的结合特性。【结果】BminCSP3开放阅读框全长为474 bp，编码157个氨基酸，含有四个半胱氨酸残基，为典型的化学感受蛋白；预测其等电点为5.41，信号肽由22个氨基酸组成，无跨膜结构域，亲水性总平均值为-0.397，是亲水性蛋白。荧光竞争结合实验结果表明，BminCSP3与供试14种气味配体的亲和力均较弱，其K_i值均大于20 μmol·L^-1。一般认为K_i值大于20 μmol·L^-1，说明蛋白与配体分子间的亲和力较弱。【结论】BminCSP3虽然在柑橘大实蝇成虫触角中显著上调表达，但可能不参与柑橘大实蝇成虫的嗅觉识别过程；或本实验所用配体并非BminCSP3最适配体，应扩大配体库进一步验证BminCSP3的嗅觉功能。

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论文DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20210336

论文分类号:S436.66

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